Алгоритм иммунодиагностики гемобластозов

Обновлено: 05.05.2024

2. Лейкоз - системное заболевание крови, характеризующееся замещением нормального костномозгового кроветворения пролиферацией менее диффе

Лейкоз - системное заболевание
крови, характеризующееся
замещением нормального
костномозгового кроветворения
пролиферацией менее
дифференцированных и
функционально активных клеток
- ранних предшественников
клеток лейкоцитарного ряда.

3. Группы повышенного риска по заболеваниям опухолевой природы

4. Факторы, связываемые с риском возникновения лейкозов

Ионизирующая радиация.
Токсические и лекарственные препараты
Вирусные факторы
Генные мутации
Синдромно-генетическое предрасположение
Иммунологические факторы
Гормональные факторы
Гипопластические состояния
Акселерация
Спленэктомия в анамнезе
Воздействие электромагнитных полей

6. Патогенез ОЛ

7. Классификация лейкозов (FAB-классификация 1976)

Лимфобластные
лейкозы
Нелимфобластные лейкозы
L1
L2
L3
М0- недифференцированный
М1 - острый миелобластный лейкоз
недифференцированный
М2 - острый миелобластный лейкоз с
дифференциацией
М3 – острый промиелоцитарный лейкоз
М4 – острый миеломонобластный лейкоз
М5 – острый монобластный лейкоз
М6- острый эритролейкоз
М7 - острый мегакариобластный лейкоз
М8 – острый эозинофильный лейкоз

8. Клиника

1. Интоксикационный синдром - слабость, лихорадка,
недомогание, потеря массы тела.
2. Гиперпластический синдром - увеличение всех групп
периферических лимфоузлов, гепатоспленомегалия,
симптомокомплекс Микулича (симметричное увеличение
слезных и слюнных желез)
3. Анемический синдром - бледность, слабость, тахикардия,
4. Геморрагический синдром связан как с тромбоцитопенией, так
и с внутрисосудистым тромбозом - петехии, экхимозы на коже и
слизистых, кровоизлияния, мелена, рвота с кровью.
5. Оссалгии, артриты
6. Синдром лейкостаза – результат агрегации бластов в
капиллярах. Характеризуется кардиореспираторными
расстройствами, отеком легких, нарушениями кровообращения
в ЦНС (инсультоподобными состояниями).
7. Увеличение яичек у мальчиков отмечается в 5-30% случаев
первичного ОЛЛ
8. Дыхательная недостаточность.

I стадия - дебют заболевания, период от начала
клинических проявлений до получения эффекта от
проводимой терапии.
II стадия - ремиссия.
Неполная клинико-гематологическая ремиссия
сопровождается нормализацией клинических
показателей и гемограммы, а в пунктате красного
костного мозга сохраняется не более 20% бластных
клеток.
Полная клинико-гематологическая ремиссия
(длительность не менее 1 мес) клинических
проявлений нет, а в миелограмме определяют не
более 5% бластных клеток и не более 30%
лимфоцитов.
III стадия - рецидив заболевания.
Костномозговой
Экстрамедуллярный
Смешанный

10. Лабораторные исследования

Общий анализ крови.
Анемия нормохромная,
гипорегенераторная
Количество лейкоцитов может
быть нормальным,
сниженным или повышенным,
часто бластемия, наличие
"лейкемического провала":
Как правило, отмечается
тромбоцитопения.

11. Миелограмма

Костномозговая пункция
должна проводиться из 34 точек (как правило, у
детей это задние и
передние гребни
подвздошных костей, у
детей до 2 лет -пяточные
кости или бугристости
больше-берцовых
костей). Изготавливается
по 7-10 мазков из каждой
точки (3 неокрашенных
мазка – в архив)

12. Миелограмма

гиперклеточный костный мозг с
суженными ростками нормального
кроветворения и инфильтрацией
бластными клетками: от 30% до
тотального замещения ими костного
мозга.

13. Алгоритм диагностики острого лейкоза

Цитохимическое исследование
окрашивание на миелопероксидазу
(МРО)
САЕ - хлорацетат эстераза
окраска на черный судан (SBB)
ANB - альфа нафтил бутиратэстераза
PAS (ШИК) - окрашивание гликогена в
бластных клетках.
кислая фосфатаза (AP) может
выявляться при Т-клеточной лейкемии.

14. Цитохимическое исследование

15. Цитохимические реакции, характерные для острых лейкозов.

Мультипараметрическая проточная
цитометрия (иммунофенотипирование)
позволяет определить:
к какой линии (Т или В) относится
лейкемический клон у данного больного
(определение группы риска)
минимальную резидуальную болезнь

16. Мультипараметрическая проточная цитометрия (иммунофенотипирование)

Иммунофенотипическая классификация острой
лимфобластной лейкемии по
EGIL (Европейская группа иммунодиагностики
лейкозов) 1995
В-ОЛЛ
Т-ОЛЛ:
Про-В-ОЛЛ (ВI)
• Про-Т-ОЛЛ (TI)
«Common»-ОЛЛ (ВII) • Пре-Т-ОЛЛ (TII)
Пре-В-ОЛЛ (BIII)
• Кортикальный ТЗрелый-В-ОЛЛ (BIV)
ОЛЛ (TIII)

17. Иммунофенотипическая классификация острой лимфобластной лейкемии по EGIL (Европейская группа иммунодиагностики лейкозов) 1995

Определения количества
хромосом и их структурных
изменений (анэуплоидия,
транслокация, инверсия,
делеция).
Укороченная 22 хромосома в
результате сбалансированной
транслокации между 22 и 9
хромосомами получила
название филадельфийской
(Ph')
• Определение ДНК-индекса
(соотношение количества
ДНК в лейкемических клетках
и в клетках с нормальным
диплоидным кариотипом).
Гиперплоидия (более 50
хромосом) – хороший
прогностический признак.
Цитогенетические и
молекулярно-генетические
методы

19. Цитогенетические и молекулярно-генетические методы

две транслокации однозначно
имеют клиническое значение:
t(9;22)(q34;q11) при Влинейном ОЛЛ (происходит
объединение гена
тирозинкиназы ABL1 9-й
хромосомы с геном BCR 22-й
с образованием химерного
белка Bcr-Abl)
t(4;11) у детей младше года
(происходит слияние
фрагментов двух генов — MLL
(11q23) и AF4 (4q21), в
результате чего образуются
химерные гены MLL-AF4 и AF4MLL. Химерный ген MLL-AF4,
сформировавшийся на
хромосоме 11 играет
решающую роль в развитии
лейкоза.

Спинномозговая пункция
Обязательное условие:
количество тромбоцитов
крови не менее 30 тыс. в
1 мкл
При цитозе более 5
клеток в мкл и наличии
бластных клеток в
цитопрепарате и/или
симптомах поражения
черепно-мозговых
нервов пациенту ставят
диагноз нейролейкоз.

21. Спинномозговая пункция

22. Группы риска

УЗИ брюшной полости и забрюшинного
пространства уточняет размеры
инфильтрированных паренхиматозных
органов, увеличенных лимфатических узлов
брюшной полости и других областей, яичек,
органов малого таза.
Рентгенография грудной клетки в двух
проекциях необходима для выявления
увеличения средостения.
Биохимический анализ крови: увеличение
ЛДГ >500 ME, возможные нарушения
функции почек, печени.
ЭКГ, ЭхоКГ необходимы перед началом
химиотерапии.
Исследование глазного дна

рентгенологическое
исследование черепа
уплотнение костной
ткани по ходу швов,
усиление рисунка
пальцевых вдавлений
и сосудистого рисунка,
остеопороз турецкого
седла.

24. рентгенологическое исследование черепа

Обследование пациента должно
происходить до начала применения
кортикостероидов, так как стероидная
терапия:
Затрудняет диагностику и «маскирует
клинику».
Снижает эффективность последующего
лечения.

Дифференциальная диагностика
Лейкемоидная реакция при сепсисе,
тяжёлых формах туберкулёза, коклюша,
опухолях и др.
Агранулоцитоз
Гипопластическая анемия
Тромбоцитопеническая пурпуря
Коллагеновые заболевания
Инфекционный мононуклеоз

26. Дифференциальная диагностика

основные виды лечения
Полихимиотерпия
Биологическая терапия
Лучевая терапия
Трансплантация костного мозга

27. основные виды лечения

Общие принципы лечения:
Строгий противоэпидемический режим
Деконтаминация кишечника колистатином,
полимиксином, нистатином. Тщательно
соблюдают гигиену полости рта.
Лечение проводят дифференцированно,
пациентов разделяют на группы исходя из
имеющихся факторов риска (клинических,
лабораторных).

28. Общие принципы лечения:

Прогностические признаки при ОЛЛ у
детей (по Л.А. Махоновой и др., 1986г.).
Фактор прогноза
Период от начала болезни до
постановки диагноза.
Возраст больного.
Увеличение периферических
лимфоузлов.
Увеличение печени.
Увеличение селезенки.
Поражение ЦНС.
Лейкоцитоз.
Гемоглобин.
Тромбоциты.
Иммуноглобулины.
Морфология бластов по ФАБ классификации.
Иммунология бластов.
Цитохимические данные:
кислая фосфотаза
ШИК-реакция.
Благоприятный
Неблагоприятный
< 3 мес.
> 3 мес.
2 - 10 лет.
До 2 лет и свыше 10 лет.
< 2 см.
> 2 см.
< 4 см.
< 4 см.
Нет.
До 20,0 х 109/л
< 70 г/л
< 100,0 х 109/л
Норма
> 4 см.
> 4 см.
Есть.
Свыше 20,0 х109/л
> 70 г/л
> 100,0 х 109/л
Снижены
L1
L 2, L 3
Т-клетки
В-клеточная
Отрицательная
Положительная
Положительная
Отрицательная

29. Прогностические признаки при ОЛЛ у детей (по Л.А. Махоновой и др., 1986г.).

Группа неблагоприятного прогноза
Возраст менее 2 лет или более 10 лет
Начальное количество лейкоцитов более 50000 тыс.
Тромбоцитопения
Мужской пол
Нейролейкоз
Выраженная органомегалия и поражения
средостения
Нелимфобластные типы лейкозов (во взрослой
практике - наоборот);
Очень злокачественными вариантами являются
монобластный, мегакариоцитарный, эритролейкоз;
В группе лимфобластных лейкозов - В-клеточный
зрелый.

30. Группа неблагоприятного прогноза

Характеристика цитостатических
средств
1.
2.
3.
4.
5.
6.
Антиметаболиты - нарушают синтез
предшественников нуклеиновых кислот в лейкозной
клетке (Метотрексат ,Тиагунин, 6-Меркаптопурин,
Цитозар)
Алкилирующие соединения - подавляют синтез ДНК и в
меньшей степени РНК в лейкозной клетке (Циклофосфан).
Алколоиды растений. (Винкристин, Этопозид)
предотвращают вхождение клетки в митоз.
Ферментные препараты (L-аспарагиназа) разрушают
аспарагин, необходмый для синтеза белков клеткой
Противоопухолевые антибиотики (Адриамицин,
Рубомицин)
Гормональные препараты (Преднизолон,
Дексаметазон)

32. Характеристика цитостатических средств

Компоненты протоколов лечения
Индукция ремиссии
Консолидация
Интенсификация терапии
(реиндукция)
Профилактика нейролейкоза
Поддерживающая терапия:
Лечение
лихорадки и нейтропении
Профилактика пневмоцистной инфекции
Профилактика герпетической инфекции
Миелотрансплантация

33. Компоненты протоколов лечения

34. Лечебный протокол ALL-BFM-90 ПРОТОКОЛ I - (направлен на индукцию ремиссии)

ПРОТОКОЛ I. Первая фаза.
Преднизолон (60 мг/м2) с 1-го по 28 день, затем
снижение дозы на 50% каждые три дня до полной
отмены.
Винкристин (1,5 мг/м2 в/в) на 8, 15, 22, 29-й день.
Рубомицин (30 мг/м2 в/в) на 8, 15, 22, 29-й день.
Перед первым введением рубомицина делается ЭКГ
и ЭхоКГ сердца (препарат кардиотоксичен).
L-Аспариназа (10000 ед/м2 в/в) на 8, 15, 18, 21, 24,
30, 33-й день.
Профилактика нейролейкоза проводится
эндолюмбальными введениями метотрексата в
возрастной дозировке 1 раз в 2 недели.

35. ПРОТОКОЛ I. Первая фаза.

Вторая фаза
Циклофосфан (1000 мг/м2 в/в) на 36-й и 64-й день
лечения. Контроль диуреза и профилактика
геморрагического цистита: гидратация 3000 мл/м2 за
24 часа; фуросемид из расчета 0,5 мг/кг внутривенно
на 6 и 12 час после циклофосфана; месна
(урометоксан) 400мг/м2 внутривенно на 0,4 и 8 часу
от начала инфузии циклофосфана.
6-Меркаптопурин - 60 мг/м2 в сутки внутрь, 36- 63-й
дни лечения.
Цитозар - 75 мг/м2 в/в в виде 4 дневных блоков; 3841 дни, 45-48, 52-55, 59-62 дни.

36. Вторая фаза

37. ПРОТОКОЛ М ( направлен на консолидацию ремиссии)

ПРОТОКОЛ М
Начинается через 2 недели после завершения протокола 1.
6-Меркаптопурин (25 мг/м2) внутрь, в течение 8
недель.
Метотрексат (1 г/м2 ) 1/10 общей дозы, вводится в
течение 30 мин; 9/10 общей дозы вводится в течение
35,5 ч. путем непрерывной инфузии, на 8, 22, 36, 50
день от начала протокола М.
Лейковорин (антидот метотрексата) 15 мг/м2 в/в
струйно или внутрь в таблетках на 42, 48, 54 час от
начала введения.
МТХ интралюмбально через 2 часа от начала
внутривенной инфузии.

38. ПРОТОКОЛ М

39. ПРОТОКОЛ II (также направлен на консолидацию ремиссии)

Первая фаза
Проводится через две недели после протокола М.
Дексаметазон (10 мг/м2) внутрь с 1 по 21 день от
начала протокола, затем дозу уменьшают каждые 3
дня на 50% до полной отмены.
Винкристин (1,5 мг/м2) - 4 внутривенных введения с
интервалом в одну неделю (максимальная доза 2
мг/м2).
Адриамицин (30 мг/м2), инфузия в течение 1 часа.
L-Аспарагиназа (10000 ЕД/м2) - инфузия в течение 1
часа на 8, 11, 15, 18 день.

40. Первая фаза

41. Вторая фаза

Поддерживающая терапия в
ремиссии (до 104 недель от начала
лечения):
6-меркаптопурин 40 мг/м²/день внутрь
метотрексат 20 мг/м²/нед. внутрь

Осложнения терапии
Синдром лизиса опухоли – гиперурекемия,
дегидротация, сепсис, ДВС-синдром, олиго-,
анурия.
Инфекции на фоне нейтропении (при
количестве нейтрофилов менее 500 в 1 мкл)
Анемический синдром.
Геморрагический синдром.
Токсическое действие химиотерапии
Цитостатическая болезнь

43. Осложнения терапии

Профилактика нейролейкоза
площадь облучения - весь мозговой
череп и обязательно три верхних
сегмента шейного отдела позвоночника.
ежедневная доза должна составлять в
первый день 1 Гр, в последующие - 1,7
Гр.
Облучать следует 5 дней в неделю до
достижения соответствующей общей
дозы (13-17 Гр)

44. Профилактика нейролейкоза

Таргетная терапия
Иматиниб (Гливек) и Дезатиниб были
разработаны для специфического
ингибирования BCR-ABL тирозинкиназы
при хронических миелолейкозах,
несущих Филадельфийскую хромосому
(Ph-позитивных).
Применяется при ОЛЛ (Ph-позитивных).

Виды ТКМ: аллогенная
(сингенная), аутологичная.
Цель аллогенной ТКМ –
замещение патологического
кроветворения больного
нормально функционирующим
костным мозгом здорового
донора (HLA-совместимого,
ареактивного в смешанной
культуре лимфоцитов).
Показания:
всем больным высокого риска в
1-ой ремиссии
больным с рецидивами ОЛЛ (за
исключением пациентов с
поздними изолированными
экстрамедуллярными
рецидивами)
Миелотрансплантация

46. Миелотрансплантация

Осложнения миелотрансплантации
трансфузионные (эмболии сгустками костного
мозга или каплями жира)
инфекционные;
геморрагические;
иммунологические (несовместимости донора и
реципиента по антигенам эритроцитов системы АВ0;
болезни «Трансплантат против хозяина»; отторжения
пересаженного аллогенного костного мозга при
наличии у реципиента антител к антигенам донора)

Алгоритм иммунодиагностики гемобластозов

При проведении иммунодиагностики гемобластозов устанавливают иммуноподвариант заболевания (в рамках морфоиммунологического диагноза), оценивают степень распространенности процесса (лейкемизация, поражение костного мозга), констатируют наличие или отсутствие минимальной резидуальной болезни.

В отличие от солидных опухолей гемобластозы являются системными заболеваниями, происходящими из клеток гемопоэтической ткани со всеми присущими этим клеткам свойствами. Лимфомные клетки, так же как и нормальные лимфоциты, легко поступают в кровеносное русло, способны циркулировать в крови и заселять любые участки организма человека. По этим причинам многообразны объекты иммунологического (и, разумеется, морфологического) исследования при диагностике гемобластозов. Объектами иммунологического исследования являются как клеточные суспензии (кровь, костный мозг, цереброспинальная жидкость, экссудаты в серозных полостях), так и биопсийный материал опухолевой ткани.

В ряде случаев (особенно при острых лейкозах и хроническом лимфолейкозе/лимфоме из малых лимфоцитов) именно клетки крови или костного мозга являются наиболее доступным объектом для иммунологического исследования. Иммуногистохимическое исследование биопсийного материала опухоли при лимфомах целесообразно дополнять иммунологическими методами, позволяющими эффективно изучать суспензии клеток.

При исследовании клеточных суспензий основным методом иммунологического анализа является проточная цитофлюориметрия. Современные возможности этого метода поистине велики. Они позволяют проводить двух-, трех- и даже четырехмерное иммунофлюоресцентное исследование на уровне одной клетки. При анализе острых лейкозов и лимфом с выраженным лейкемическим компонентом (например, лимфоме из малых лимфоцитов/хроническом лимфолейкозе, ХЛЛ) в этом, как правило, нет необходимости: популяция клеток гомогенна и маркерный профиль опухолевых клеток очевиден.

Иная ситуация при обнаружении той или иной пропорции лейкозных/лимфомных клеток среди нормальных клеток крови или костного мозга. В этих случаях необходимы идентификация опухолевых клеток на основе их линейной принадлежности (Т- или В-линия) и последующий анализ клональности или дифференциально-диагностических маркеров. Подобный анализ требует одновременного исследования 2 или 3 антигенов на мембране клетки с использованием прямых конъюгатов моноклональных антител с различными флюорохромами.

Гомогенная популяция лимфоцитов крови при хроническом лимфолейкозе. Непрямое иммунофлюоресцентное окрашивание, проточная цитометрия на приборе FACScan.
а — светорассеяние лазерного луча: мономорфная популяция лимфоидных клеток; б — все клетки экспрессируют В-клеточный антиген CD19 (попадают в регион Ml). В этом случае положительная реакция на другие антигены будет относиться к лейкозным В-лимфоцитам, что позволяет охарактеризовать иммунофенотип В-ХЛЛ. Здесь и на рис. 24.2; 24.15; 24.18; 24.19 и 24.22 автоматически выдаваемая проточным цитометром подпись FSC-Height (1) vs SSC—Height (2) означает: на оси абсцисс — уровень (Height — высота) сигнала прямого рассеяния света лазерного луча-параметра, отражающего размер клетки (FSC — Forward Scatter), на оси ординат — уровень бокового рассеяния света лазерного луча — параметра, отражающего гранулярность клетки (Side Scatter). Цифра в скобках, например (1), означает номер анализируемого параметра: 1 — FSC, 2 — SSC, 3 —FL1 (флюоресценция 1, обычно флюоресцеина изотиоцианат, FITC), 4 — FL2 (флюоресценция 2, обычно фикоэритрин, РЕ), 5 — FL3 (флюоресценция 3, обычно конъюгат РЕ/Су5).

При диагностике гемобластозов необходимо участие специалистов различного профиля: гистологов, цитологов, гемоцитологов, иммунологов, цитогенетиков, молекулярных биологов. Важным при изучении гемобластозов является формирование панели диагностических моноклональных антител (МКА). Набор используемых антител может различаться в зависимости от целей исследования. Определены некоторые стандарты для проведения иммунодиагностики лейкозов и лимфом методами проточной цитофлюориметрии.

Не существует единых стандартизованных подходов к исследованию биопсийного материала. В зависимости от пристрастий и опыта патолога, а также по ряду организационных причин (оборудование, реактивы) иммунодиагностика лимфом, основанная на изучении биопсийного материала, может проводиться по парафиновым блокам, криостатным срезам или путем дезинтеграции клеток и переведения их в суспензию. При исследовании по парафиновым блокам, (наиболее распространенный метод), обычно используют традиционное иммуногистохимическое (иммуноферментное) окрашивание материала. При анализе по криостатным срезам чаще применяется иммунофлюоресцентный метод.
При переведении клеток в суспензию становится возможным использование проточной цитофлюориметрии. Каждый из этих методов имеет свои плюсы и минусы.

Опыт РАМН, основанный на иммунологическом изучении нескольких тысяч лимфом, свидетельствует о необходимости использования различных методов для иммунодиагностики лимфом. Иммунофенотипическое исследование при диагностике лимфом целесообразно проводить по гистологическим срезам опухоли. Это позволяет изучать лимфомные клетки в их естественных взаимоотношениях с неопухолевыми клетками лимфатического узла, устанавливать характер роста опухоли (нодулярный, диффузный). Исследование лимфомных клеток на срезах под микроскопом позволяет раздельно оценить крупноклеточный и мелкоклеточный компоненты, что не всегда возможно при использовании проточной цитометрии. Методом первой линии при проведении иммунодиагностики лимфом по биопсийному материалу целесообразно считать иммунофлюоресцентный.

Цитограмма иммунофлюоресцентного окрашивания лимфоцитов крови при лимфоме из клеток мантии.
Прямая реакция иммунофлюоресценции: на оси абсцисс — МКА CD5 (метка — флюоресцеин, FITC), на оси ординат — МКА CD20 (метка — фикоэритрин, РЕ). Присутствуют нормальные Т-лимфоциты (яркая экспрессия CD5, отсутствие CD20); значительная часть клеток более слабо экспрессирует CD5 и имеет на мембране CD20 (лейкемическая популяция); присутствует небольшая пропорция нормальных В-клеток — CD20+ CD5-.

Иммуноферментное окрашивание применяется при лимфомах с плеоморфным клеточным составом, где необходима детальная морфологическая характеристика опухолевой ткани. Во всех случаях, когда не доступен свежий биопсийный материал опухоли, производят иммуноферментное окрашивание по блокам (особенно при анализе консультативного материала из других учреждений).

При иммуноморфологическом анализе биопсийного материала опухоли предпочтение отдается лю-минисцентной микроскопии. Случаи, при которых установить иммунологический вариант опухоли иммунофлюоресцентным методом не представляется возможным, являются редкими. Существуют варианты лимфом, которые из-за своей редкости или полиморфизма клеточного состава нуждаются в детальной морфологической характеристике. Иммунофлюоресцентный анализ удобен в тех случаях, когда необходимо каждодневное исследование множества биопсийных образцов (в условиях крупных научных медицинских центров). Этот метод при использовании качественных реактивов и хорошего люминисцентного микроскопа является практически свободным от артефактов, достаточно быстрым в исполнении и информативным.

Другой важный аргумент в пользу иммунофлюоресцентного метода — необходимость использования широкого набора моноклональных антител в каждом случае при проведении иммунологической диагностики лимфом. В отличие от солидных опухолей при диагностике лимфом требуется не только установить гистогенетическую принадлежность опухоли, но также определить ее подвариант и степень зрелости (по крайней мере, разграничить лимфомы из клеток-предшественниц и лимфомы из периферических клеток). Обычно для этого требуется 12—15 маркеров. Иммунофлюоресцентный метод при проведении исследований на криостатных срезах является с организационной точки зрения трудоемким: необходимо наличие криомикротома, квалифицированной работы с криостатными срезами, люминисцентный микроскоп, а в идеале и программное компьютерное обеспечение для хранения наиболее информативных препаратов в виде компьютерных файлов.

Если эти организационные вопросы удается решить, рутинная иммунофлюоресцентная диагностика лимфом становится высокоинформативным, быстрым и свободным от артефактов методом.

Набор моноклональных антител для иммунодиагностики гемобластозов

Маркер	Клеточный тип	Антиген
CD1a	Кортикальные тимоциты, субпопуляция В-клеток, дендритические клетки	HLA-подобный белок, может связываться с b2-микроглобулином
CD2	Т-клетки, большинство NK-клеток	Рецептор Е-розеткообразования, лиганд LFA-3
CD3	Мембранная экспрессия на зрелых Т-клетках, цитоплазматическая экспрессия на незрелых Т-клетках	Ассоциирован с Т-клеточным рецептором, опосредует передачу сигнала
CD4	Хелперные/«индукторные» Т-лимфоциты, моноциты, незрелые миелоидные клетки	Рецептор для молекул HLA II и ВИЧ
CD5	Тимоциты, зрелые Т-клетки, субпопуляция В-клеток	Сцеплен с Т-клеточной пролиферацией
CD7	Т-клетки, NK-клетки, субпопуляция незрелых миелоидных клеток	Белок с мол. массой 40 000 Д, костимуляторная молекула в активации Т-клеток
CD8	Цитотоксические/супрессорные Т-клетки, субпопуляция NK-клеток	Рецептор для молекул HLAI
CD10	с-ОЛЛ, лимфоидные клетки-предшественницы, нейтрофилы, подкласс зрелых В-клеток	Общий антиген ОЛЛ (CALLA), нейтральная эндопептидаза (энкефалиназа)
CD11b	Моноциты, макрофаги, нейтрофилы, NK-клетки	Молекула адгезии, C3bi-рецептор
CD11c	Моноциты, нейтрофилы, NK-клетки, субпопуляция В-клеток	Молекула адгезии, gp150/95
CD13	Миелоидные клетки	Аминопептидаза N
CD14	Моноциты, слабая экспрессия на нейтрофи-лах	Рецептор для LPS
CD15	Нейтрофилы, слабая экспрессия на моноцитах	Х-гаптен, 3-фукозил-N -ацетил-лактозамин
CD16	NK-клетки, нейтрофилы, субпопуляция моноцитов	Низкоаффинный рецептор для IgG
CD19	Предшественники В-клеток и зрелые В-клетки	Мост для сигнала через мембранные иммуноглобулины
CD20	Субпопуляция В-клеточных предшественников, В-клетки	Ионный канал, субстрат протеинкиназы С
CD22	Мембранная экспрессия на В-клетках, цитоплазматическая экспрессия на В-клеточных предшественниках	Родствен NCAM, мост для сигнала через мембранные иммуноглобулины
CD23*	Субпопуляция В-клеток	Низкоаффинный Fc-рецептор для IgE
CD24	В-лимфоциты, активированные Т-лимфоциты, нейтрофилы	Сцепленный с GPI (гликозил-фосфатидилинозитолом) гликопротеин с мол. массой 35—45 000 Д
CD25	Активированные Т- и В-лимфоциты	а-Цепь рецептора для ИЛ-2
CD30	Активированные Т- и В-лимфоциты, клетки Березовского—Штернберга	Гликопротеин с мол. массой 105 000 Д; антиген Ki-1
CD33	Моноциты, миелоидные предшественники, слабая экспрессия на нейтрофилах	Гликопротеин с мол. массой 67 000 Д, обладает лектиновой активностью
CD34	Миелоидные и лимфоидные клетки-предшественницы	Гликопротеин с мол. массой 105-120 000 Д, молекула адгезии
CD38	Активированные лимфоциты, субпопуляция В-клеток, плазматические клетки	Гликопротеин с мол. массой 45 000 Д, АДФ-рибозилциклаза
CD41a	Тромбоциты, мегакариоциты	Гликопротеин IIb/IIIa, рецептор фибронектина
CD42b	Тромбоциты, мегакариоциты	Гликопротеин Ib, часть рецептора для фактора Виллебранда
CD45	Все лейкоциты	Антиген Т200, тирозинфосфатаза
CD61	Тромбоциты, мегакариоциты	Гликопротеин IIIа, b-цепь витронектинового рецептора
CD64	Моноциты, макрофаги	Высокоаффинный рецептор для IgG
CD65	Нейтрофилы, слабая экспрессия на моноцитах	Церамид додекасахарид 40, MKAKCD65 ингибируют респираторный взрыв в нейтрофилах
CD71	Эритроидные клетки, активированные Т- и В-лимфоциты, макрофаги	Рецептор трансферрина
CD79a	В-лимфоциты, включая незрелые В-клетки	Iga/mb-1, часть В-клеточного рецептора для антигена
CD103	Интраэпителиальные лимфоциты	HML-1
CD117	Миелоидные клетки-предшественницы	c-Kit, рецептор для фактора стволовых клеток
CD163	Моноциты, макрофаги	Семейство рецепторов-мусорщиков
FMC7	Дифференцированные В-лимфоциты	Гликопротеин с мол. массой 105 000 Д
Гликофорин А	Эритроциты, эритробласты и эритроидные клетки-предшественницы	Сиалированный гликопротеин
HLA-DR	В-лимфоциты, активированные Т-лимфоциты, моноциты, клетки-предшественницы	Часть HLA II комплекса
МРО	Лизосомальная экспрессия в нейтрофилах и моноцитах, включая незрелые миелоидные клетки	Миелопероксидаза
TdT	Ядерная экспрессия в лимфоидных клетках-предшественницах	Терминальная дезоксинуклеотидилтрансфераза
TCR а/b	Большинство Т-лимфоцитов	a/b-цепи Т-клеточного рецептора
TCR у/q	Подкласс Т-лимфоцитов	у/5-Цепи Т-клеточного рецептора
к	Мембранная экспрессия на В-лимфоцитах	L-цепь иммуноглобулина к-типа
h	Мембранная экспрессия на В-лимфоцитах	L-цепь иммуноглобулина h-типа
u	В-лимфоциты	Н-цепь иммуноглобулина класса u

Диагностика лимфом по криостатным срезам, окрашенным конъюгатами моноклональных антител с флюорохромами, требует большого опыта и навыка работы. Основное отличие от стандартной гистологической и гистохимической диагностики состоит в том, что в каждом срезе при иммунофлюоресцентном окрашивании видны только антигенпозитивные клетки в темном поле. По этой причине необходимо знание того, как распределены те или иные антигенпозитивные клетки в нормальном лимфатическом узле для установления тканевой атипии при лимфомах.

Главным преимуществом флюоресцентного метода, проводимого на криосрезах опухолевой ткани, фиксированных в ацетоне, является то, что исследование антигенов осуществляется без их разрушения или видоизменения. Это отличает его от стандартно используемых для иммуноферментного метода фиксации в формалине и парафиновой заливки, в процессе которой многие белковые молекулы разрушаются или видоизменяются. В результате их антигенные свойства утрачиваются, что требует дополнительной обработки (восстановления) перед проведением иммуноферментного анализа.

Панели МКА для диагностики лимфом на срезах опухоли не являются стандартизованными. Это обусловлено тем, что патологи разных стран отдают предпочтение работе на криостатных либо парафиновых срезах.

Алгоритм исследования лимфом в отечественных институтах гематологии таков. Криостатные срезы окрашивают в непрямой реакции иммунофлюоресценции на следующие маркеры: HLA-DR, CD23, CD38, CD19, CD37, CD5, CD45, CD163, CD21, CD15, CD7, CD4, CD8, CD10, CD3. Использование этой панели является достаточным для подтверждения гемопоэтической природы опухоли и установления большинства вариантов неходжкинских лимфом: лимфомы из малых лимфоцитов/ В-ХЛЛ, лимфомы из клеток мантии фолликулов (для верификации диагноза определяется ядерная экспрессия циклина D1), фолликулярной лимфомы (для дифференциальной диагностики с реактивными процессами целесообразно определение bcl-2), лимфом из клеток маргинальной зоны, вариантов крупноклеточных лимфом, Т-клеточных лимфом.

При крупноклеточных лимфомах, Т-клеточных лимфомах, лимфогранулематозе, негемопоэтических опухолях диагностическая панель антител расширяется: включают по показаниям маркеры CD1a, CD2, TCRab и TCRy5, CD30, CD15, цитокератины, Egp34. При лимфомах из клеток-предшественниц и миелобластных гематосаркомах необходимо использовать CD34, CD 13, CD33 и некоторые другие маркеры.

Цели и задачи иммунологического изучения опухолей из миелоидных клеток (ОМЛ) и лимфоидных клеток (ОЛЛ/лимфомы из клеток-предшественниц и периферические лимфомы) различны.

Редактор: Искандер Милевски. Дата обновления публикации: 18.3.2021

ИММУНОДИАГНОСТИКА ОСТРЫХ ЛЕЙКОЗОВ

Иммунофенотипирование методом проточной цитометрии является важным компонентом в диагностике острых лейкозов. Данная работа представляет результаты иммунофенотипирования острых лейкозов, что позволяет глубже охарактеризовать фенотип клеток опухолевой природы и способствует выбору наиболее рациональной терапии.

Ключевые слова: острые лейкозы, проточная цитометрия, иммунофенотипирование.

Острый лейкоз (ОЛ) — это клональное злокачественное новообразование, в основе которого лежит дефект стволовых клеток различного уровня, либо поражение клеток-предшественников. Морфологическим субстратом заболевания являются неопластически трансформированные клетки, обладающие способностью к подавлению нормального гемопоэза и инфильтрирующие костный мозг, постепенно вытесняя и угнетая нормальные ростки кроветворения [1]. Алгоритм диагностики острых лейкозов в современной клинике основан на пяти базовых компонентах:

— получение клинических данных;

— морфологический анализ бластов;

— цитохимический анализ бластов;

— иммунофенотипирование методом проточной цитометрии;

Поистине революционное значение для диагностической иммунологии и гематологии оказала разработка методов получения моноклональных антител, что было подтверждено в 1984 присуждением Нобелевской премии Kohler и Milstein вместе с Jerne за вклад в развитие теоретической иммунологии и биотехнологии [2]. Иммунодиагностика гемобластозов основана на сопоставлении морфофункциональных характеристик лейкозных бластов и нормальных/нетрансформированных клеток гемопоэза. По набору мембранных и цитоплазматических антигенов можно установить линейную принадлежность, стадию зрелости и функциональное состояние клетки. С начала 80-х годов ХХ века, когда развитие моноклональных антител пошло по экспоненте, стало возможным нарастающее по сложности иммунофенотипирование. К настоящему времени ИФТ превратилось в быстрый и полезный способ получения подробной характеристики опухолевых клеток, необходимой для диагностики ОЛ [3].

Для иммунофенотипирования ОЛ достаточна оценка экспрессии маркеров скриннинговой панели (BCSH, 2002) [4]:
(a) миелоидные маркеры:
МПО, CD13, CD33;
(b) Лимфоидные маркеры:
1. Маркеры Т-лимфоцитов — CD2, CD7, cyCD3 и sCD3;
2. Маркеры В-лимфоцитов — CD10, CD19, cyCD22 и sCD22.
3. Незрелость клетки характеризуют TdT, CD34, HLA-DR.

Цель исследования: изучение значения иммунофенотипирования клеток костного мозга в диагностике острых лейкозов.

Материалы и методы исследования: нами обследовано 35 больных с ОЛ в отделении гематологии ГКБ №7 г. Алматы. Для диагностики мы использовали общеклиническое обследование, морфологическое цитологическое и цитохимическое исследование, иммунофенотипирование костного мозга. Для иммунодиагностики ОЛ были использованы панели моноклональных антител и скрининг Европейской группы по иммунологической диагностики, 2002г. Иммунофенотипирование проводилось на проточном цитофлуометре FacsCalibur (Becton Dickinson — Германия).

Результаты и обсуждение: средний возраст обследованных 35,5±3 лет, 54% больных составили мужчины; 46% – женщины. При клиническом исследование выявлены следующие синдромы: опухолево-интоксикационный в 97% случаях, гиперпластический – 43%, анемический – 94%, геморрагический – 46%, специфическая лихорадка – 78%, язвенно-некротический – 28%, вторичного иммунодефицита – 86%.

При анализе результатов ИФТ костного мозга взрослых больных с острыми лейкозами, острые миелобластные варианты лейкоза диагностированы в 77% случаев и ОЛЛ — в 23% случая, в том числе В-линейные ОЛЛ — у 88,9% пациентов, Т- линейные ОЛЛ — у 11,1%.

Иммунофенотип М0 FAB-подварианта ОНЛ -CD117, ц-МП, CD13±, CD33±(м.б. HLA-DR, CD34, CD38; в 50-70% случаев экспрессия лимфоидных антигенов CD2, CD4, CD7, CD10 и TdT)

Иммунофенотип М1 FAB -подварианта ОНЛ-CD33, CD13, CD65, CD117, ц-МП, (м.б. HLA-DR, CD38; CD34±, нечасто CD4, CD11b, CD15 и CD65)

Иммунофенотип М2 FAB -подварианта ОНЛ-ц- МП, CD11b, CD15, CD65, CD13, CD33, CD65, CD117 (в 50-60% наблюдений CD34, HLA-DR; м.б. экспрессия лимфоидных маркеров CD10, CD2, CD7, CD19).

Иммунофенотип М3 FAB -подварианта ОНЛ — резко увеличена экспрессия МП, CD13, CD33 и CD65; вариабельна CD11b и CD15, слабая CD34 при отсутствии HLA-DR; в 40% наблюдений CD2).

Иммунофенотип М4 FAB -подварианта ОНЛ-МПО, CD11b, CD11c, CD14, CD15, CD13, CD33, CD65, HLA-DR, CD38, CD34±.

Иммунофенотип М5 FAB -подварианта ОНЛ-МПО, HLA-DR, CD4; CD11b, CD11c, CD14, CD15, CD33, CD65, CD36±.

Иммунофенотип М6 FAB -подварианта ОНЛ-Гликофорин А (GPA), HLA-DR, CD38, трансфериновый рецептор CD71, CD34± .

Иммунофенотип М7 FAB -подварианта ОНЛ-CD41a, CD42b и/или CD61 (м.б. экспрессия CD13, CD33, HLA-DR, CD38, CD34).

Иммунофенотип ОЛЛ из ранних предшественников (про- B-ОЛЛ)- CD19, cytCD22, cyt79a, TdT, CD34, у ½ CD20, слабая экспрессия CD22, CD45 (при наличии обменов 11q23 экспрессия CD15)

Иммунофенотип пре-пре-В- клеточного варианта ОЛЛ-CD10, CD19, CD22, CD79a, TdT, CD20, редко CD34.

Иммунофенотип пре В- клеточного варианта ОЛЛ-Cyt μ- цепь при отсутствии Sm Ig, CD10, CD19, CD22, CD79a, TdT, редко CD20, CD34.

Иммунофенотип В- клеточного варианта ОЛЛ-CD19, CD22, CD20, Sm IgM с рестрикцией κ или λ, редко TdT, отсутствие CD34 .

Иммунофенотип Т- клеточных вариантов ОЛЛ-Главное — CytCD3.

Выводы. Таким образом, иммунофенотипирование опухолевых элементов при остром лейкозе позволяет глубже охарактеризовать фенотип клеток опухолевой природы, диагностировать М0, М7, ОМЛл, ОЛЛм и БОЛ варианты ОЛ, что способствует выбору наиболее рациональной врачебной тактики ведения больных. Данный метод совместно с результами цитогенетического исследования дает возможность определять минимальную остаточную болезнь и точнее оценивать прогноз этих заболеваний.

1 Абдулкадыров К.М. Гематология. Новейший справочник. – СП-б.: 2004 г.

2 Bene M., Castoldi G., Knapp W. et al. Proposals for the immunological classification of acute leukemias. European Group for the Immunological Characterization of Leukemias (EGIL).// Leukemia. – 1995. — 9(10).- P. 1783–6.

3 Методические рекомендации «Современные методы диагностики острых лейкозов у детей и взрослых». – Минск: 2001.

4 Craig F. E., Foon K. A. Flow cytometric immunophenotyping for hematologic neoplasms // Blood – 2008.- 111. – P. 3941–67.

Э.З. ГАББАСОВА, А.К. КОСАНОВА, З.Б. ИБРАГИМОВА, Г.Ә. ТӘЖЕН, Ж.Е. СҮГІРӘЛІ, К.А. ТАУШАН, Б.Е. ТУРЛЫХАНОВА

ЖЕДЕЛ ЛЕЙКОЗДАРДЫҢ ИММУНОДИАГНОСТИКАСЫ

Түйін: Ағымдық цитометрия әдісімен иммунофенотиптеу жедел лейкоздардың диагностикасында маңызды компонент болып табылады. Аталған жұмыс жедел лейкоздарды иммунофенотиптеу нәтижесін көрсетеді, бұл ісік жасушаларының фенотипін тереңірек сипаттауға және неғұрлым рациональды емді таңдауға мүмкіндік береді.

Түйінді сөздер: жедел лейкоздар, ағымды цитометрия, иммунофенотиптеу.

E.Z. GABBASSOVA, A.K. KOSSANOVA, Z.B. IBRAGIMOVA,

G.A. TAZHEN, ZH.E. SUGIRALI, K.A. TAUSHAN, B.E.TURLYKHANOVA

IMMUNODIAGNOSIS ACUTE LEUKEMIAS

Resume: Immunophenotyping by flow cytometry is an important component in the diagnosis of acute leukemia. This work presents the results of immunophenotyping of acute leukemia, which allows deeper characterize the phenotype of the tumor cells and promotes the natural selection of the most rational therapy.

Keywords: acute leukemia, flow cytometry, immunophenotyping.

ОТДЕЛЕНИЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВОГО ЛЕКАРСТВЕННОГО ЛЕЧЕНИЯ

Отделение противоопухолевого лекарственного лечения входит в состав Отдела лекарственного лечения злокачественных новообразований МРНЦ имени А.Ф. Цыба, является одним из самых молодых отделений Центра, которое специализируется на применении уникальных авторских методик в лечении онкологических пациентов

ОМС, талон на ВМП

Заведующая отделом лекарственного лечения злокачественных новообразований, врач-онколог, д.м.н, Наталья Александровна Фалалеева

Записаться к врачу

Оставьте заявку и ожидайте консультацию нашего специалиста

Основные направления деятельности отделения

Химиотерапия

Выбор противоопухолевого лекарственного лечения сегодня основывается с одной стороны - на четком понимании механизмов зарождения и развития болезни, изучении микроскопических и генетических характеристик злокачественной опухоли, с другой – на тщательном изучении индивидуальных особенностей организма пациента. Только при условии комплексного видения обеих составляющих возможно разработать наиболее эффективную и хорошо переносимую программу химиотерапии. В своей практической деятельность сотрудники отделения руководствуются именно этим принципом – принципом индивидуального (персонализированного) подхода к каждому пациенту. Традицией отделения стал консилиум врачей при выборе программы лечения для каждого пациента.

Лечение онкозаболеваний

При планировании лечения используется мировой и отечественный опыт, изложенный в самых современных рекомендательных системах по лечению злокачественных новообразований, а также собственные уникальные терапевтические подходы. В отделении ведутся разработки новых собственных терапевтических протоколов, специалисты отделения принимают активное участие в международных сертифицированных исследованиях. Проводится консультирование и лечение следующих заболеваний: рак молочной железы, рак лёгкого, рак желудка, рак поджелудочной железы, колоректальный рак, рак печени, онкогинекологические заболевания, онкоурологические заболевания, опухоли головы и шеи, нейроэндокринные опухоли, опухоли головного мозга, опухоли мягких тканей и костей.

В рамках научной и практической тематики Отделение противоопухолевого лекарственного лечения МРНЦ имени А.Ф. Цыба наряду со стандартными терапевтическими протоколами используются эксклюзивные методики лечения злокачественных новообразований, эффективность которых доказана многолетним опытом применения. Число пациентов, которым применение уникальных методик принесло высокоэффективное излечение исчисляется тысячами

Эксклюзивные методики

Адоптивная иммунотерапия в сочетании с химиотерапией.
В настоящее время в Центре запатентована и внедрена в практику новая медицинская технология «Адоптивная иммунотерапия онкологических больных активированными цитотоксическими лимфоцитами». Данный вид лечения относится к так называемой «бутиковой терапии», т.е. невоспроизводимой в массовых масштабах, клеточный иммуннопрепарат изготавливается индивидуально для каждого пациента. Подобная программа не входит в стандарты лечения, предусмотренные ОМС и, к сожалению, в настоящее время доступна только в рамках платных медицинских услуг.

Результаты исследований последних лет показывают способность злокачественной опухоли избегать действия клеток иммунной системы и нарушать нормальную работу иммунной системы. Следствием такого неправильного иммунного ответа у онкологического больного является ускользание опухоли из-под иммунологического надзора, в результате злокачественная опухоль создает себе благоприятные условия для роста и развития метастазов. Поэтому все большее значение в терапии онкологических заболеваний приобретают комплексные подходы с использованием методов иммунотерапии, включая клеточную терапию.
Одним из достаточно эффективных и, что не менее важно, безопасных методов, обеспечивающих повышение результата противоопухолевого лечения, улучшение качества жизни онкологического пациента и переносимости химиотерапии, является адоптивная терапия активированными цитотоксическими лимфоцитами в сочетании с цитокинами. Данные метод направлен на активацию собственной иммунной системы пациента и усиление работы так называемого эффекторного звена за счет цитотоксических Т-лимфоцитов (CTL) и NK-клеток (т.е. клеток-убийц опухоли). Суть метода: у больного берется кровь из вены, выделяются цитотоксические Т-лимфоциты и NK-клетки (т.е. клетки-убийцы рака). Клетки помещают в специальные условия, где они проходят этап «обучения», целью которого является усиление активности в отношении клеток злокачественной опухоли. В завершении подготовленные, заряженные информацией и энергией клетки, возвращают в кровяное русло пациента, направляются к опухоли и ее метастазам. Рекомендуется использование этой методики в составе стандартного противоопухолевого лекарственного лечения (химиотерапии). План подобного комплексного терапевтического воздействия на опухоль разрабатывается совместно с врачами-иммунологами Отдела лабораторной медицины МРНЦ имени А.Ф. Цыба

Химиотерапия в сочетании с системной фотодинамической терапией в составе комплексного лечения злокачественных новообразований. Суть метода: внутривенно капельно пациенту вводится раствор фотосенсибилизатора. Одновременно с введением фотосенсибилизатора проводится лазерное облучение крови больного лазерном.

Суть метода: внутривенно капельно пациенту вводится раствор фотосенсибилизатора. Одновременно с введением фотосенсибилизатора проводится лазерное облучение крови больного лазерном. Перед началом процедуры больного оповещают о соблюдении светового режима и фиксируют это в стационарной карте пациента. Рекомендуется использование этой методики в составе стандартного противоопухолевого лекарственного лечения (химиотерапии). В основе применения этой методики лежит глубокий биологический смысл и четкое понимание механизмов развития рака. Как уже сказано выше, возникновение злокачественной опухоли обычно напрямую связано с нарушением работы иммунной системы и ускользанием опухолевых клеток из-под иммунологического надзора в результате целого комплекса событий. С другой стороны, применение традиционных методов лечения (химиотерапия) у больных злокачественными опухолями само по себе приводит к нарушению функций иммунной системы, создавая косвенные условия для возникновения рецидива (возврата) опухоли. Возникает некий замкнутый круг. Метод системной ФДТ с использованием фотосенсибилизирующего (делающего клетки более чувствительными к воздействию света) лекарства оказывает восстанавливающее действие на сниженные иммунологические показатели, обладает иммуномодулирующим эффектом в отношении иммунных клеток. Результаты собственных и опубликованных исследований показали, что применение метода системной ФДТ у больных с распространенными стадиями злокачественных новообразований обладает иммуномодулирующим эффектом в отношении иммунных клеток (преобразовывает действие иммунной системы). При этом достигнутый уровень иммуномодуляции сохраняется в течение длительного времени. При последующих иммунологических исследованиях в течение 4-6 месяцев отмечалась стабилизация восстановленных иммунологических показателей, что выражалось в улучшении клинического состояния больных и качества жизни. С другой стороны, в настоящее время широко обсуждается тот факт, что опухолевые клетки при большинстве видов злокачественных новообразований, определяются в крови больного, то есть перемещаются с током крови по организму и обеспечивают повышенный риск развития метастазов. Опытным путем было показано, что характеристика этих перемещающихся по крови клеток отличается от характеристики «оседлых» (составляющих саму опухоль). Эти клетки менее чувствительны к лучевой терапии и химиотерапии. По собственным данным нашего Центра такие клетки потенциально высоко чувствительны к воздействию системной ФДТ. Кроме того, влияние фотодинамической терапии создает условия для перехода покоящихся метастатических клеток в активированное состояние тем самым делая их доступными для лекарственного воздействия. Рекомендуется использование этой методики в составе стандартного противоопухолевого лекарственного лечения (химиотерапии). План подобного комплексного терапевтического воздействия на опухоль разрабатывается совместно с врачами Отдела фотодинамической диагностики и терапии МРНЦ имени А.Ф. Цыба.

Химиотерапия в сочетании с системной фотодинамической терапией в составе комплексного лечения злокачественных новообразований

Химиотерапия или лекарственное лечение злокачественного новообразования представляют собой комплексную терапевтическую программу, включающую собственно режим химиотерапии – обычно комбинацию точно выверенных по дозам и способу введения лекарственных препаратов, обладающих максимальным эффектом в отношении определенного вида злокачественной опухоли, а также комплекс мер профилактики осложнений проведенного лечения

Почтарь М.Е.

Иммунофенотипирование в диагностике гемобластозов

Основы иммунодиагностики лейкозов были заложены в 70-х годах с появлением гибридомной технологии получения моноклональных антител (МАТ), с помощью которых стало возможным определять антигенные клеточные структуры, объединенные общим термином «кластер дифференцировки - CD».

Лабораторная диагностика нарушений обмена железа

В учебном пособии рассмотрены современные данные о роли железа в организме человека и диагностические показатели, характеризующие как недостаток железа, так и перегрузку железом, представлены диагностические критерии заболеваний, ассоциированные с нарушениями обмена железа, впервые введены разделы по диагностическому значению новых ретикулоцитарных параметров и гепсидина.

Цель учебного пособия – помочь персоналу клинико-диагностических лабораторий и гематологам освоить учебный материал по клинико-диагностическому значению лабораторных показателей, характеризующих обмен железа в организме, и правильно составить диагностический алгоритм обследования больных с железодефицитной и другими видами анемий и гемохроматозами.

Гематологический атлас

Луговская С.А., Почтарь М.Е. Издательство Триада. - 2011 г., 368 стр.

В этом обновленном издании авторы добавили новые видеоизображения,дополнены разделы «Острые лейкозы», «Лимфопролиферативные заболевания», «Анемии»новыми клиническими случаями с микрофотографиями и результатами иммунофенотипирования. Представлены современные данные, касающиеся патогенеза миелопролиферативных заболеваний.

Лабораторная диагностика анемий

Долгов В.В., Луговская С.А., Морозова В.Т., Почтарь М.Е. Москва. - Издательство Триада, 2006 год, 146 стр. Второе издание.

Второе издание руководства переработано с учётом последних достижений в области биохимических и гематологических исследований в лаб.диагностике.

Цитохимическая диагностика в лабораторной гематологии. Методическое руководство. Атлас

Луговская С.А., Почтарь М.Е., Морозова В. - Триада. - 2003 г. - 80 стр.

Гематологический атлас

Луговская С.А., Почтарь М.Е. - М.-Тверь, Изд.: «Триада», 2008 г. 296 стр.,

В обновлённом издании атласа авторы добавили новые иллюстрации, дополнили разделы «Острые лейкозы» и «Лимфопролиферативные заболевания» новыми клиническими случаями с микрофотографиями и результатами иммунофенотипирования. Представлены современные данные, касающиеся патогенеза миелопролиферативных заболеваний.

Гематологические анализаторы. Интерпретация анализа крови

Книга задумана как руководство для проведения гематологических исследований в учреждениях амбулаторно-поликлинического (первичного) звена здравоохранения, которые в рамках Национального проекта «Здоровье» оснащаются современными гематологическими анализаторами.

Ретикулоциты

Луговская С.А., Почтарь М.Е. - М., 2006 , 60 стр.

Исследование ретикулоцитов является основным гематологическим тестом, оценивающим активность эритропоэза. В настоящее время в КДЛ активно внедряются новые высокотехнологичные гематологические анализаторы, с помощью которых дополняются традиционные представления и интерпретация лабораторных исследований.

Лабораторная гематология. Руководство для врачей

Луговская С.А., Морозова В.Т., Почтарь М.Е., Долгов В.В. М-Тверь, Изд. «Триада», 2006, 158 стр., ISBN: 5-94789-156-5

Руководство для врачей. Второе дополненное и переработанное издание.

В книге представлены современные сведения о кроветворении, гематологических показателях, их диагностическом значении, технологиях лабораторного гематологического исследования. Материал систематизирован и изложен таким образом, чтобы он служил в качестве руководства при анализе крови-самом массовом исследовании в клинико-диагностических лабораториях.

Иммунофенотипирование в диагностике гемобластозов

Луговская С.А., Почтарь М.Е., Тупицын Н.Н. - М-Тверь. Изд. «Триада», 2005, 168 стр.

Современная терапия лейкозов и злокачественных лимфом требует детальной идентификации лейкозных клеток. В книге описаны этапы дифференцировки и созревания гемопоэтических клеток с учетом анализа клеточных маркеров дифференцировки миелоидного и лимфоидного рядов, наиболее часто используемых для диагностики лейкозов и лимфопролиферативных заболеваний.

Данный сайт и опубликованные на его страницах материалы предназначены исключительно для ознакомления и использования в информационных и образовательных целях и не являются заменой полноценному лечению.

Читайте также: