Туляремия. Возбудитель туляремии. Эпидемиология туляремии. Распространенность туляремии. Морфология туляремии. Тинкториальные свойства туляремии.
Обновлено: 04.05.2024
Туляремия — это острая инфекционная природно-очаговая болезнь грызунов, некоторых видов домашних животных, пушных зверей. Болезнь протекает в септической форме с поражением легких и лимфатических узлов. К возбудителю восприимчив и человек. Заражение человека
может произойти во время снятия шкурок и переработки промысловых животных, кроликов и овец, при употреблении в пишу инфицированных продуктов, а также при загрязнении воды и пищевых продуктов выделениями больных грызунов. Болезнь у человека может протекать остро или хронически и характеризуется поражением лимфатических узлов, а также головной болью.
Возбудитель — францизелла тулярензис (Francisella tularensis) — был выделен В 1911 Г.
Морфология. Возбудитель туляремии — мелкая (0,3x0,7 мкм) полиморфная, неподвижная, не образующая спор палочка (рис. 26). Может проходить через бактериальные фильтры. В мазках из культур, выращенных I искусственных питательных средах, выявляется в виде кокков. В организме образует капсулу. По Граму красится отрицательно, нередко окрашивается биполярно.
Культуральные свойства. Возбудитель туляремии — строгий аэроб, не растет на простых питательных средах, нуждается в ростовых факторах (кровь, желток куриного яйца, экстракты тканей животных, цистеин) и глюкозе. Оптимальные температура роста 37 °С, рН среды 7—7,3. При росте в цистеино-глюкозном кровяном бульоне на поверхности образует нежную пленку. На плотной среде с добавлением ростовых факторов развивается в виде мелких прозрачных или молочного цвета слизистых колоний.
Ферментативные свойства. Микроб обладает незначительной ферментативной активностью. Слабо ферментирует глюкозу, левулезу, мальтозу с образованием кислоты, но без газа. Протеолитическими свойствами не обладает, индола не образует. Некоторые штаммы дают а-гемолиз. При распаде клеток выделяется эндотоксин.
Устойчивость. Возбудитель туляремии характеризуется слабой устойчивостью к воздействию различных факторов внешней среды. Под воздействием прямых солнечных лучей он погибает через 20 мин. В открытых водоемах остается жизнеспособным свыше 38 дней, в охлажденном мясе — до 35 дней, в замороженном молоке и мясе — до 3 мес, в соленом — до 31 дня, в зерне, более 4 мес, в шкурках грызунов — 35—45 дней. В молоке и сливках, хранящихся при 8—10 °С, возбудитель выживает в течение 7 дней, в кислом молоке и твороге — 2 дня. Возбудитель неустойчив к высокой температуре. При нагревании до 100 °С гибнет в течение нескольких секунд, при 55—60 °С — через 10— 20 мин. Возбудитель неустойчив к дезинфицирующим веществам' 3—5%-ный раствор карболовой кислоты убивает его за 3— 5 мин, 1—3%-ный раствор лизола — за 3, 50%-ный спирт — за5 мин.
Патогенность. Возбудитель поражает водяных крыс, ондатр, бобров, зайцев, диких кроликов, хомяков, белок, домовых мышей и обыкновенных полевок, кошек, собак, лисиц, кур, воробьев, сорок, ворон. Из сельскохозяйственных животных наиболее восприимчивы овцы, менее — крупный рогатый скот и свиньи. Из лабораторных животных более чувствительны к возбудителю морские свинки, белые мыши и кролики.
Диагностика. Для бактериологической диагностики отбирают кровь, лимфатические узлы, паренхиматозные органы и заражают внутрибрюшинно или подкожно морских свинок или белых мышей. После гибели животных выделяют чистую культуру возбудителя путем посева на специальные среды. Для прижизненной диагностики болезни используют серологический (реакция агглютинации РА, реакция преципитации РП) и аллергический методы. На месте введения аллергена (тулярина) образуются папула и некроз ткани.
Профилактика. По ветеринарному законодательству больных и подозрительных в заболевании туляремией животных к убою не допускают. В случае убоя больных животных их туши вместе с органами и шкурой уничтожают. Продукты убоя, полученные от здоровых животных, вследствие загрязнения их пометом и мочой грызунов зачищают и используют на данном предприятии для производства вареных изделий. Рабочих вакцинируют живой сухой туляремийной вакциной. Помещение цеха, инвентарь, оборудование дезинфицируют.
Возбудитель туляремии
В 1910 г. сотрудники Калифорнийской противочумной станции обратили внимание на чумоподобные бубоны у местных сусликов, обитающих вблизи озера Туляре.
Лишь в 1912 году удалось обнаружить микроорганизм, названный Bacterium tularensis.
В 1925 году в Японии выделен тот же микроорганизм.
Их идентичность доказана Френсисом, он же установил, что болезнь передается от грызунов к человеку. Род микроорганизмов назван в честь него.
Исторические факты
Осторожно! Оружие массового поражения!
Первый опыт применения биологического оружия в военных действиях относится к II тысячелетию до нашей эры и принадлежит Хеттам- они отправляли зараженных туляремией овец, что вызывало мор в стане врага.
В 1942 году при битве под Сталинградом данное ОМП использовалось немцами против русских
Есть данные о использовании его в1999 в Косово.
Первое в истории бактериологическое оружие.
Морфология и тинкториальные свойства
Очень мелкие (0,3-0,5 мкм) полиморфные палочки
Спор не образует
Доминируют кокковидные формы
Слабо воспринимают анилиновые красители и окрашиваются бледнее, чем другие грамотрицательные бактерии
Культуральные свойства
На искусственных средах переходят из S в R – форму (в авирулентную и неиммуногенную) Вакцинные штаммы бактерий представляют собой промежуточную форму изменчивости, которую обозначают как SR-вариант.
яичный желток (среда Мак-Коя или Чепина)
экстракты органов и тканей животных, для роста необходим цистеин.
Являются внутриклеточными паразитами!
Культуральные свойства
Не растёт на простых питательных средах!
На плотных средах - мелкие колонии молочно-белого цвета.
В жидких средах размножаются только у поверхности среды
Хорошо культивируется в желточном мешке куриного эмбриона
Биохимическая активность – очень низкая
Глицерин + Отличает наиболее патогенный вид
Антигенная структура:
О-аг Определяет экзотоксические свойства
Vi-аг Определяет вирулентность и вызывает аллергическую реакцию (поверхностный)
Обладает антигенным сродством с бруцеллами и возбудителем чумы.
Факторы патогенности
Вызывает общую интоксикацию.Высвобождаются при лизисе бактериальной клетки.Вызывает стойкое повышение температуру тела.Общее недомогание
Определяет вирулентность и вызывает аллергическую реакцию (поверхностный)
Защищает от фагоцитоза
Проникновение Лимфоузлы(лимфаденит) Фагоцитоз Выделение эндотоксина (подъем температуры тела) Общая интоксикация Бактериемия Генерализация процесса
Резистентность
Длительно сохраняется при низких температурах (0-4оС до 6 месяцев)
Хорошо сохраняется в воде, выдерживает высушивание
Плохо устойчивы к высоким температурам (при кипячении 1-2 мин) и солнечному свету
При обработке дезинфектантами сохранятся 3-5 мин.
Чувствительны к некоторым антибиотикам (стрептомицин, гентамицин)
Эпидемиология и пути передачи Источник: мелкие грызуны,Зайцы,Кровососущие,Реже другие животные (82 вида) ,Больной и выздоравливающий человек
Пути: трансмиссивный (клещи, слепни, комары),контактный,алиментарный,аэрозольный
Диагностика
Материал для исследования : Гной из бубонов, пунктат лимфатических узлов, соскоб из язвы, отделяемое конъюнктивы, налет из зева мокрота, кровь, паталого-анатомический материал.
1.Первоначально необходимо определить форму болезни.
2.Для диагностики используются все методы.
Стойкий Пожизненный Развивается аллергизация организма к антигенам
Лечение и профилактика
1.Антибиотикотерапия: Стрептомициновый ряд, тетрациклиновый ряд
2. При затяжных формах АБ терапию сочетают с вакцинотерапией.
Профилактику проводят в 3 стадии:
1-я стадия: устранение источника
2-я стадия: разрыв механизма и путей передачи
3-я стадия: специфическая профилактика – туляремическая вакцина по эпидемиологическим показаниям.
Тут вы можете оставить комментарий к выбранному абзацу или сообщить об ошибке.
Туляремия
Существует 7 клинических синдромов, связанных с туляремией (см. таблицу Виды туляремии Виды туляремии ); клинические проявления могут варьировать в зависимости от типа экспозиции микроорганизма.
Возбудитель, F. tularensis, является маленькой, плеоморфной неподвижной неспорообразующей аэробной грамотрицательной бациллой, которая проникает в живой организм следующим образом:
Прием в пищу зараженной еды или воды
Укус зараженного членистоногого (клеща, мухи оленя, блохи)
Прямой контакт с зараженными тканями или материалом
Туляремия не передается от человека к человеку.
Микроорганизм может проникнуть через вроде бы цельный кожный покров, но может фактически попасть и через микротрещины.
Большинство случаев заболевания туляремией вызывают два типа F. tularensis:
Тип A: это более вирулентный серотип для людей, обычно встречается у кроликов, зайцев и грызунов в США и Канаде.
Тип В: обычно вызывает язвенно-железистую инфекцию в легкой форме и встречается у грызунов и в акваториях всего северного полушария, включая Северную Америку, Европу и Азию.
Обычно заражаются охотники, мясники, фермеры и обработчики меха. В зимние месяцы большинство случаев являются результатом контакта (особенно во время сдирания кожи) с зараженными дикими кроликами и зайцами. В летние месяцы инфекция обычно является следствием обработки шкур зараженных животных, или птиц, или укусов зараженных клещей, или других членистоногих. Изредка случаи являются результатом употребления термически необработанного мяса, зараженной воды или косьбы в эндемичных областях. На Западе США клещи, мухи оленя, мухи лошади и прямой контакт с зараженными животными также представляют собой источники инфекции. О случаях трансмиссии от человека к человеку не сообщалось. Лабораторные работники подвергаются особенно высокому риску, поскольку могут легко инфицироваться во время рутинной работы с зараженными образцами.
При диссеминированных случаях характерные очаговые некротические поражения на различных стадиях развития рассеяны по всему организму. Размером от 1 мм до 8 см в диаметре, имеют беловато-желтый цвет; внешне проявляются как первичные поражения на пальцах, глазах или в полоси рта и обычно появляются на лимфоузлах, селезенке, печени, почках и легких. При пневмонии некротические очаги появляются в легких. Хотя может быть и тяжелая системная интоксикация, никакие специфические токсины не обнаруживаются.
Симптомы и признаки туляремии
Начало туляремии внезапное, через 1–10 (обычно 2–4) дней после заражения, с головной болью, ознобом, тошнотой, рвотой, лихорадкой от 39,5 ° до 40° C и выраженной общей слабостью. Развиваются выраженная слабость, рецидивирующий озноб и проливные поты. Клинические проявления зависят в некоторой степени от типа заражения (см. таблицу Виды туляремии Виды туляремии ).
В пределах 24–48 часов на месте поражения (палец, рука, глаз, небо) появляется воспаленная папула, за исключением железистой или тифоидной туляремии. Папула быстро переходит в пустулу и превращается в язву с образованием чистого кратера язвы со скудным, тонким, бесцветным эксудатом. Язвы обычно одиночные на конечностях, но множественные во рту или глазах. Обычно поражен только один глаз. Региональные лимфоузлы увеличены, могут нагнаиваться и затем дренироваться. К 5-му дню часто развивается похожее на тиф состояние, у пациента может начаться нетипичная пневмония, иногда сопровождаемая делирием.
Пневмоническая туляремия может начаться после воздушно-капельного или гематогенного заражения другим типом туляремии; это развивается в 10–15% случаев язвенно-железистой туляремии и приблизительно в 50% случаев тифоидной туляремии. Хотя часто присутствуют признаки инфильтрации легочной ткани, ослабленное дыхание и непостоянные хрипы могут быть единственными физикальными проявлениями пневмонии при туляремии. Сухой, непродуктивный кашель связан с чувством жжения в ретростернальной области. Неспецифичная сыпь, похожая на розеолезную, может появиться на любой стадии болезни. Спленомегалия и периспленит также могут выявляться. При отсутствии лечения температура тела остается повышенной в течение 3–4 недель и постепенно снижается. Медиастинит, абсцесс легкого и менингит – редкие осложнения.
Диагностика туляремии
Серологическое исследование (в острой фазе и в период выздоровления) и полимеразная цепная реакция (ПЦР)
Диагноз устанавливается на основании данных о контактах с кроликами, зайцами или грызунами, или заражения от членистоногого переносчика, внезапном появлении симптомов, при наличии характерного первичного следа от укуса и регионарной лимфаденопатии.
У пациентов необходимо производить забор крови и образцов соответствующего клинического материала (например, из очагов поражений или мокроты) для последующего культивирования. Оно может давать отрицательные результаты, поэтому лаборатория должна быть уведомлена о подозрении на диагноз туляремии, для того чтобы можно было подобрать соответствующие селективные среды (и обеспечить необходимые меры безопасности при работе с этим возбудителем).
Титры антител в острой стадии и в период выздоровления должны быть исследованы с интервалом в 2 недели. Диагностическими являются 4-х кратное повышение титров или если один титр > 1:128. Сыворотка пациентов с бруцеллезом Бруцеллез Бруцеллез вызывается виды Brucella, грамотрицательной бактерией. Симптомы начинаются с острого фебрильного заболевания с несколькими локальными признаками или без них и могут прогрессировать. Прочитайте дополнительные сведения может перекрестно реагировать с антигенами F. tularensis, но обычно титры значительно ниже. Некоторые лаборатории используют флуоресцентный анализ антител или иммуногистохимическое окрашивание. ПЦР-тестирование может обеспечить быструю диагностику.
Часто имеется лейкоцитоз, но количество лейкоцитов крови может быть нормальным с увеличением только пропорции полиморфноядерных клеток.
Поскольку этот микроорганизм является высоко контагиозным, образцы и среды от пациентов с подозрением на наличие туляремии должны быть обработаны с чрезвычайной осторожностью и, если возможно, в лаборатории с оборудованием высокого уровня (уровень 3) биологической безопасности.
Прогноз при туляремии
Смертность приближается к нулю при лечении и составляет приблизительно 6% при отсутствии лечения случаев язвенно-железистой туляремии. Смертность выше при инфекции типа А и при тифоидной, септицемической и пневмонической туляремии; она достигает 33% при отсутствии лечения. Смерть обычно наступает при генерализованной инфекции, пневмонии, менингите или перитоните. Рецидивы могут произойти в случае неправильного лечения. У переболевших даже один раз приобретается иммунитет.
Лечение туляремии
Стрептомицин (плюс хлорамфеникол при менингите)
Предпочтительным препаратом является
Стрептомицин в дозе 1 г внутримышечно каждые 12 часов для взрослых и 15 мг/кг внутримышечно каждые 12 часов для детей в течение 7 - 10 дней при течении болезни от умеренной до тяжелой степени
Если есть доказательства менингита, добавляют хлорамфеникол по 12,5–25 мг/кг внутривенно каждые 6 часов или доксициклин 100 мг перорально 2 раза в день в течение 14–21 дня.
Альтернативы стрептомицину включают в себя следующее:
Гентамицин 1-2 мг/кг внутримышечно или внутривенно каждые 8 часов (при течении болезни от умеренной до тяжелой степени)
Доксициклин 100 мг перорально каждые 12 часов (при легком течении болезни)
Хлорамфеникол 12,5-25 мг/кг внутривенно каждые 6 часов (следует применять только для лечения менингита, так как в остальных случаях есть более эффективные и безопасные альтернативы)
Ципрофлоксацин 500 мг перорально каждые 12 часов (при легком течении болезни)
При массовом поражении, если парентеральное лечение невозможно, можно применять оральный доксициклин или ципрофлоксацин для взрослых и детей. Однако иногда при назначении всех этих лекарств наблюдаются рецидивы, и они не всегда предотвращают нагноение узла.
Постоянные влажные гипертонические повязки полезны при первичных поражениях кожи и могут уменьшить тяжесть воспаления лимфатических узлов и лимфаденита. Хирургический дренаж крупных абсцессов редко необходим, если терапия не отсрочена.
При глазной туляремии применение теплых солевых компрессов и использование темных очков дают некоторое облегчение. В тяжелых случаях 2% гоматоприм по 1–2 капли каждые 4 часа может облегчить симптоматику.
Интенсивная головная боль обычно снижается пероральными анальгетиками.
Профилактика туляремии
Попадая в эндемичные области, люди должны использовать защитную одежду от клещей и репелленты. Осмотр в поисках клещей должен проводиться после выхода из инфицированных клещами областей. Клещей следует удалять сразу же (см. боковую колонку ).
Контактируя с кроликами, зайцами и грызунами, особенно в эндемичных областях, люди должны носить защитную одежду, включая резиновые перчатки и маски, потому что возбудители могут быть у животного и в экскрементах насекомых, и на меху животного. Дикие птицы и дичь должны быть тщательно приготовлены перед употреблением в пищу.
Вода, которая может быть заражена, должна быть продезинфицирована перед использованием.
В настоящее время вакцины отсутствуют, хотя одна вакцина в данный момент находится на рассмотрении в Управлении по контролю за пищевыми продуктами и лекарственными средствами (FDA). После воздействия высокого риска (например, авария в лаборатории) рекомендуется антибиотикопрофилактика в течение 14 дней доксициклином или ципрофлоксацином.
Основные положения
F. tularensis является высококонтагиозным микроорганизмом; в США и Канаде главным резервуаром являются дикие кролики, заяйцы и грызуны.
Туляремией можно заразиться разными путями, в том числе через прямой контакт с инфицированными животными (особенно кроликами и зайцами) или птицами, через укусы инфицированных членистоногих, через случайный контакт с лабораторными образцами, или, реже, путем вдыхания инфекционного аэрозоля или приема в пищу зараженного мяса или воды.
У пациентов развивается лихорадка 39,5-40 ° С и другие системные симптомы (например, головная боль, озноб, тошнота, рвота, выраженная общая слабость) вместе со специфическими проявлениями, связанными с пораженным органом; кожные поражения и/или лимфаденит являются наиболее распространенными, также могут возникать пневмонии.
Диагноз устанавливают с помощью посевов крови и соответствующего клинического материала; также информативными могут быть определение антител в острый период и период выздоровления, полимеразная цепная реакция (ПЦР) и некоторые методы окрашивания.
Лечат стрептомицином (в комбинации с хлорамфениколом при менингите).
В эндемических районах следует принимать соответствующие меры предосторожности, в том числе стратегии защиты от клещей, использование защитной одежды при работе с кроликами, зайцами и грызунами, тщательное приготовление блюд из диких птиц и диких животных.
Авторское право © 2022 Merck & Co., Inc., Rahway, NJ, США и ее аффилированные лица. Все права сохранены.
Возбудитель туляремии, классификация, общая характеристика, факторы патогенности. Эпидемиология и патогенез туляремии. Лабораторная диагностика, специфическая профилактика.
Таксономия: отдел Gracilicutes, род Francisella. Возбудитель – Francisella tularensis. нет семейства.
Морфология: мелкие кокковидные полиморфные палочки, неподвижные, грамотрицательные, не образующие спор, могут образовывать капсулу.
Культуральные свойства: Факультативный аэроб, оптим. температура+37С. На простые питательных средах не растет. Культивируется на желточных средах, на средах с добавлением крови и цистеина. Рост медленный. Образуют мелкие колонии, круглые с ровным краем, выпуклые, блестящие.
РАСТЕТ НА КРОВЯНЫХ И СЫВОРОТОЧНЫХ СРЕДАХ.
Биохимические свойства: слабо ферментируют до кислоты без газа глюкозу, мальтозу, левулезу, маннозу, образуют сероводород. Туляремийный микроб по вирулентности разделен на подвиды: голарктическую (не ферментирует глицерин, цитруллин), неарктическую (ферментирует глицерин, не ферментирует цитруллин; среднеазиатскую (ферментирует глицерин и цитруллин, мало вирулентен).
Антигенные свойства: Содержит соматический О-и поверхностный Vi- антигены. Имеют антигенную близость с бруцеллами. В R- форме теряют Vi- антиген, а вместе с ним вирулентность и иммуногенность.
Факторы патогенности: неарктический подвид – высокая патогенность для человека при кожном заражении, голарктический и среднеазиатский подвиды – умеренно патогенны. Вирулентными являются S-формы колоний. Патогенные свойства связаны с оболочечным антигенным комплексом и токсическими веществами типа эндотоксина. Вирулентность обусловлена: капсулой, угнетающей фагоцитоз; нейраминидазой, способствующей адгезии; эндотоксином (интоксикация); аллергенными свойствами клеточной стенки; КАПСУЛА, ЭНДОТОКСИН, ВНУТРИКЛЕТОЧНОЕ ПАРАЗИТИРОВАНИЕ.
Эпидемиология: природно-очаговое заболевание. Источник инфекции – грызуны. Множественность механизмов передачи. Передача возбудителя через клещей, комаров. Человек заражается контактным, алиментарным, трансмиссивными путями. БОЛЕЮТ ОХОТНИКИ.
Резистентность: в окружающей среде сохраняется долго, нестоек к высокой температуре, чувствителен к антибиотикам (тетрациклин, левомицетин).
Патогенез: На месте внедрения возбудителя (кожа, слизистые оболочки глаз, дыхательных путей, желудочно-кишечного тракта) развивается первичный воспалительный очаг, откуда возбудитель распространяется по лимфатическим сосудам и узлам, поражая их с образованием первичных бубонов; в различных органах формируются гранулемы. Микроб и его токсины проникают в кровь, что приводит к бактериемии и генерализации процесса, метастазированию и развитию вторичных туляремийных бубонов.
ЛИМФА → КРОВЬ → ИНТОКСИКАЦИЯ
Клиника. Инкубационный период 3-7 дней. Болезнь начинается остро, внезапно с повышения температуры тела. Различают бубонную, язвенно-бубонную, глазо-бубонную, абдоминальную, легочную и генерализованную(септическую) клинические формы туляремии.
Иммунитет. После перенесенной инфекции иммунитет сохраняется длительно, иногда пожизненно; развивается аллергизация организма к антигенам возбудителя.
Микробиологическая диагностика:
Бактериоскопическое исследование:Из исследуемого материала готовят мазки, окрашивают по Грамму. В чистой культуре - мелкие кокки. В мазках из органов преобладают палочковидные формы. Спор не образуют, грамотрицательные, иногда выражена биполярная окраска.
Бактериологическое исследование и биопроба.Применяются для выделения чистой культуры бактерий туляремии. Наиболее чувствительными животными являются мыши и морские свинки, которые погибают даже при подкожном введении единичных бактерий. Выделение бактерий туляремии проводят на свернутой яично-желточной среде, глюкозоцистиновом кровяном агаре. Вирулентные штаммы образуют S-формы колоний-мелкие, гладкие, беловатого цвета с голубоватым оттенком.
Идентификацию чистой культуры проводят по морфологии бактериальных клеток, характеру роста, биохимическим и антигенным свойствам. Биохимические свойства этих бактерий выявляются на специальной плотной среде с ограниченным содержанием белка. Бактерии туляремии содержат оболочечный антиген, с которым связаны их вирулентные и иммуногенные свойства, и О-соматический антиген. По антигенным свойствам близки к бруцеллам.
Серодиагностика.Ставится реакция агглютинации с туляремийным диагностикумом. Относительно позднее появление агглютининов в крови (на 2-й неделе болезни) затрудняет применение этой реакции для ранней диагностики, однако их длительное сохранение делает возможной ретроспективную диагностику. Обязательно прослеживается нарастание титра агглютинации. Наиболее чувствительным методом серодиагностики туляремии является РПГА.
Для экспресс-диагностики применяется кровяно-капельная реакция: кровь из пальца наносят на стекло, добавляют каплю дистиллированной воды (для лизиса эритроцитов), вносят каплю диагностикума и смешивают стеклянной палочкой. При наличии в крови агглютининов в диагностическом титре (1:100 и выше) в капле немедленно наступает агглютинация диагностикума; при титрах ниже диагностических агглютинация происходит через 2-3 мин.
Кожно-аллергическая проба.Выпускаются два вида тулярина: для внутрикожной пробы и для надкожной. Проба высокочувствительна и дает положительные результаты у больных, начиная с 3-5-го дня болезни, но также и у переболевших и вакцинированных, поэтому оценка реакции должна проводиться с осторожностью.
Лечение: антибиотики стрептомицинового и тетрациклинового ряда. В случае затяжного течения – комбинированная антибиотикотерапия с использованием убитой лечебной сыворотки.
Профилактика: специфическая профилактика - применяют живую туляремийную вакцину. Иммунитет длительный, проверяется с помощью пробы с тулярином.
Туляремийный диагностикум –взвесь убитых бактерий туляремии, применяется в случае постановки реакции агглютинации при серодиагностике.
Тулярин – взвесь туляремийных бактерий (вакцинного штамма), убитых нагреванием, для постановки кожно-аллергической пробы.
Туляремийная живая сухая накожная вакцина –высушенная живая культура вакцинного штамма, для профилактики.
Возбудитель сибирской язвы, классификация, общая характеристика, факторы патогенности. Эпидемиология и патогенез, лабораторная диагностика различных форм сибирской язвы, специфическая профилактика.
Сибирская язва - острая антропонозная инфекционная болезнь, вызываемая Bacillus anthracis, характеризуется тяжелой интоксикацией, поражением кожи, лимфатических узлов.
Таксономия. Возбудитель относится к отделу Firmicutes, роду Bacillus, семейство Bacillaceae.
Морфологические свойства. Очень крупные грамположительные палочки с обрубленными концами, в мазке из чистой культуры располагаются короткими цепочками (стрептобациллы). Неподвижны; образуют расположенные центрально споры, а также капсулу.
Культуральные свойства. Аэробы. Хорошо растут на простых питательных средах в диапазоне температур 10-40С, температурный оптимум роста 35С. На жидких средах дают придонный рост; на плотных средах образуют крупные, с неровными краями, шероховатые матовые колонии (R-форма) - МИКРОСКОПИЧЕСКИ - “ГОЛОВА МЕДУЗЫ”. На средах, содержащих пенициллин, через 3ч роста сибиреязвенные бациллы образуют сферопласты, расположенные цепочкой и напоминающие в мазке жемчужное ожерелье.
Биохимические свойства. Ферментативная активность достаточно высока: возбудители ферментируют до кислоты глюкозу, сахарозу, мальтозу, крахмал, инулин; обладают протеолитической и липолитической активностью. Выделяют желатиназу, обладают слабой гемолитической, лецитиназной и фосфатазной активностью.
Выделяют желатиназу, проявляют низкую гемолитическую, лецитиназную и фосфатазную активность.
Антигены и факторы патогенности. Содержат родовой соматический полисахаридный и видовой белковый капсульный антигены. Образуют белковый экзотоксин, обладающий антигенными свойствами и состоящий из нескольких компонентов (летальный, протективный и вызывающий отеки). Вирулентные штаммы в восприимчивом организме синтезируют сложный экзотоксин и большое количество капсульного вещества с выраженной антифагоцитарной активностью.
-ЛЕТАЛЬНЫЙ - НЕКРОЗ, ОТЕК ЛЕГКИХ
-ОТЕЧНЫЙ (ЧЕРЕЗ АДЕНИЛАТЦИКЛАЗУ)
Резистентность. Вегетативная форма неустойчива к факторам окружающей среды, споры чрезвычайно устойчивы и сохраняются в окружающей среде, выдерживают кипячение. Чувствительны к пенициллину и другим антибиотикам; споры устойчивы к антисептикам.
-АЛИМЕНТАРНО (СПОРА НЕ ПОГИБАЕТ ПРИ ВАРКЕ МЯСА)
-ВОЗДУШНО-ПЫЛЕВОЙ (БОЛЕЗНЬ СКОРНЯКОВ)
Клиника. Различают кожную, легочную и кишечную формы сибирской язвы. При кожной (локализованной) форме на месте внедрения возбудителя появляется характерный сибиреязвенный карбункул, сопровождается отеком. Легочная и кишечная формы относятся к генерализованным формам и выражаются геморрагическим и некротическим поражением соответствующих органов.
Иммунитет. После перенесенной болезни развивается стойкий клеточно-гуморальный иммунитет.
Микробиологическая диагностика:
Наиболее достоверным методом лабораторной диагностики сибирской язвы является выделение из исследуемого материала культуры возбудителя. Диагностическую ценность представляют также реакция термопреципитации по Асколи и кожно-аллергическая проба.
Бактериоскопическое исследование. Изучение окрашенных по Граму мазков из патологического материала позволяет обнаружить возбудителя, представляющего собой грамположительную крупную неподвижную стрептобациллу. В организме больных и на белковой питательной среде микроорганизмы образуют капсулу, в почве- споры.
Бактериологическое исследование.Исследуемый материал засевают на чашки с питательным и кровяным агаром, а также в пробирку с питательным бульоном. Посевы инкубируют при 37С в течение 18ч. В бульоне В. anthracis растет в виде хлопьевидного осадка; на агаре вирулентные штаммы образуют колонии R-формы. Авирулентные или слабовирулентные бактерии образуют S-формы колоний.
В. anthracis обладает сахаролитическими свойствами, не гемолизирует эритроциты, медленно разжижает желатин. Под действием пенициллина образует сферопласты, имеющие вид «жемчужин». Это явление используется для дифференциации В. anthracis от непатогенных бацилл.
Биопроба.Исследуемый материал вводят подкожно морским свинкам, кроликам. Готовят мазки из крови и внутренних органов, делают посевы для выделения чистой культуры возбудителя.
Экспресс-диагностикапроводится с помощью реакции термопреципитации по Асколи и иммунофлюоресцентного метода.
Реакцию Асколи ставят при необходимости диагностировать сибирскую язву у павших животных или у умерших людей. Образцы исследуемого материала измельчают и кипятят в пробирке с изотоническим раствором хлорида натрия в течение 10 мин, после чего фильтруют до полной прозрачности.
Метод иммунофлюоресценции позволяет выявить капсульные формы В. anthracis в экссудате. Мазки из экссудата через 5-18 ч после заражения животного обрабатывают капсульной сибиреязвенной антисывороткой, а затем флюоресцирующей антикроличьей сывороткой. В препаратах, содержащих капсульные бациллы, наблюдается желто-зеленое свечение возбудителя.
Кожно-аллергическая проба.Ставится на внутренней поверхности предплечья - внутрикожно вводят 0,1 мл антраксина. При положительной реакции через 24 ч появляются гиперемия и инфильтрат.
Лечение: антибиотики и сибиреязвенный иммуноглобулин. Для антибактериальной терапии препарат выбора – пенициллин.
Профилактика. Для специфической профилактики используют живую сибиреязвенную вакцину. Для экстренной профилактики назначают сибиреязвенный иммуноглобулин.
Преципитирующая сибиреязвенная сыворотка.Получена из крови кролика, гипериммунизированного культурой В. anthracis. Применяется для постановки реакции термопреципитации по Асколи.
Сибиреязвенная живая вакцина СТИ.ОСЛАБЛЕННЫЙ БЕСКАПСУЛЬНЫЙ ВОЗБУДИТЕЛЬ. Применяется для профилактики сибирской язвы.
Противосибиреязвенный иммуноглобулин.Гамма-глобулиновая фракция сыворотки крови, гипериммунизированной живой сибиреязвенной вакциной и вирулентным штаммом В.anthracis, используется с профилактической и лечебной целью. ДОНОРСКИЙ, ДЛЯ ЭКСТРЕННОЙ ПРОФИЛАКТИКИ ПРИ КОНТАКТЕ С БОЛЬНЫМИ.
Туляремия биохимические свойства. 31. Возбудитель туляремии. Лабораторная диагностика туляремии.
31. Возбудитель туляремии. Лабораторная диагностика туляремии.
Основной вид - F.tularensis - возбудитель туляремии - природноочаговой инфекции, резервуаром которой являются многие виды преимущественно мелких диких позвоночных животных (представителей четырех основных семейств - мышевидных, заячьих, беличьих и тушканчиковых). На территории России основными носителями являются мышевидные грызуны - водяные крысы, ондатры, различные виды полевок. Помимо F. tularensis к этому роду относится F. novicida, патогенность которой для человека не доказана.
Франциселлы - мелкие кокковидные или элипсоидные полиморфные палочки, неподвижные, грамотрицательные, не образующие спор.
Строгие аэробы, оптимум температуры около +37 градусов Цельсия, pH- близкая к нейтральной. Культивируют на агаровых и желточных средах сложного состава с добавлением цистеина, глюкозы, крови. Рост медленный. Образуют мелкие колонии, напоминающие капельки росы, круглые с ровным краем, выпуклые, блестящие, с голубоватым отливом.
Слабо ферментируют до кислоты без газа некоторые углеводы (глюкозу, мальтозу, левулезу, маннозу), образуют сероводород. Туляремийный микроб по вирулентности для кроликов и биохимическим особенностям, а также географическому распространению разделен на подвиды (эколого - географические расы):
- голарктическую (не ферментирует глицерин, не имеет фермента цитруллинидазы, маловирулентен для кроликов и человека, распространен в Евразии);
- неоарктическую (ферментирует глицерин, не имеет цитруллинидазы, более вирулентен для кроликов и человека, распространен в Северной Америке);
- среднеазиатскую (ферментирует глицерин, имеет цитруллинидазу, мало вирулентен, вариант mediasiatica выявляют в Средней Азии, вариант japonica - в Японии).
По отношению к эритромицину голарктическая раса делится на два типа - устойчивый и чувствительный.
F.tularensis в S (вирулентной) форме имеет два основных антигенных комплекса - О антиген (обнаруживает сходство с О - антигенами бруцелл) и Vi (капсульный) антиген. Диссоциация SR приводит к утрате капсулы, вирулентности и иммуногенности.
На территории России выделено 7 основных ландшафтных типов природных очагов туляремии: пойменно-болотный, луго-полевой, степной, лесной, предгорно-ручьевой, тундровый и тугайный (пойменно-пустынный) со своими основными хозяевами возбудителя и эколого-эпидемиологическими особенностями. Человек очень чувствителен к туляремийному микробу, минимальная инфицирующая доза - одна микробная клетка. Животные по чувствительности к этому микроорганизму разделены на четыре группы. Особое значение в условиях Западной Сибири имеют водяные крысы и ондатры. Заражение человека может происходить путем контакта с грызунами или инфицированными ими предметами, алиментарным путем (инфицированные грызунами вода и пищевые продукты), воздушно-пылевым путем, трансмиссивно (иксодовые клещи и другие кровососы).
Возбудитель туляремии является внутриклеточным паразитом. Его вирулентность обусловлена:
- капсулой, угнетающей фагоцитоз;
- нейраминидазой, способствующей адгезии;
- аллергенными свойствами клеточной стенки;
- способностью размножаться в фагоцитах и подавлять их киллерный эффект;
- наличием рецепторов к Fc- фрагменту IgG, подавлять активность систем комплемента и макрофагов.
Франциселлы проникают в организм через кожу и слизистые глаз, рта, дыхательных путей, желудочно-кишечного тракта. Г.П. Руднев (1970) предложил в патогенезе туляремии выделить следующие стадии:
1. Внедрения и первичной адаптации возбудителя.
2. Лимфогенного заноса.
3. Первичных регионарно-очаговых (туляремийный бубон) и общих реакций.
4. Гематогенных матастазов и генерализации.
5. Вторичной полиочаговости.
6. Реактивно-аллергических изменений.
7. Обратного метаморфоза и выздоровления.
В ряде случаев процесс может ограничиваться первыми тремя фазами.
Основными клиническими формами туляремии являются язвенно-бубонная (ульцерогландулярная), глазо-бубонная (окулогландулярная), легочная, абдоминальная, генерализованная, другие формы (в т.ч. ангинозно-гландулярная), неуточненная.
Бактериологические методы диагностики туляремии для человека имеют дополнительное значение и не всегда эффективны, что определяется биологическими особенностями возбудителя и особенностями инфекции у человека (малая концентрация возбудителя в органах и тканях).
Биопроба является намного более эффективным методом диагностики. Материал от больного (пунктат бубона, выделения с конъюнктивы, пленка с миндалин, мокрота и др.) используют для заражения лабораторных животных (чаще белых мышей), из органов павших животных делают высевы на питательные среды, культуру идентифицируют по совокупности следующих признаков:
а) морфология клеток и грамотрицательная окраска;
б) рост на желточной среде и специальных средах и отсутствие роста - на простых мясо-пептонных средах;
в) специфическое свечение в реакции иммунофлюоресценции (МФА);
г) агглютинация культуры туляремийной сывороткой;
д) способность вызывать гибель белых мышей и морских свинок с характерными патологоанатомическими изменениями в органах и выделением чистой культуры.
Бактериологические методы и биопробы могут выполняться только специализированными лабораториями, имеющими разрешение на работу с возбудителем туляремии (2 группа патогенности). В качестве метода выявления туляремийного микроба может использоваться МФА, реакция нейтрализация антител - РНАТ, в качестве дополнительного - ПЦР.
Наибольшее значение в лабораторной диагностике туляремии имеют серологические методы - РА, РПГА. Обязательно исследование парных сывороток крови. Дополнительными серологическими методами являются ИФА, РНИФ.
Аллергодиагностика (проба с тулярином - туляремийным аллергеном) чаще используется для оценки естественного и вакцинального иммунитета. ГЗТ развивается на первой неделе болезни, а также после вакцинации и сохраняется несколько лет. У больных накожные и внутрикожные туляриновые пробы не рекомендуются в связи с возможностью ухудшения состояния больного. Могут применяться методы аллергодиагностики in vitro - реакция лейкоцитолиза, РТМЛ и др.
На неблагополучных по туляремии территориях применяют живую туляремийную вакцину. Иммунитет длительный, проверяется с помощью пробы с тулярином. С помощью этой пробы отбирают контингенты на вакцинацию и ревакцинацию.
Читайте также: